人體血液中一氧化碳的分析——定性分析2
一、檢材采取和保存
CO中毒惟一重要檢材是血液-心血,非心包液、胸腔雜血。為防止血樣凝成塊,可在血樣中加少許EDTA固體,因凝成塊狀的血定量偏低。當(dāng)死亡時間長而取不出心血時,取帶心包液的心血或胸腔血代替,送檢時一定要對所送檢材加以充分說明,使用時先離心只取用紅血球多的部分,其它血清和雜質(zhì)棄去。
CO中毒血可保存較長時間,不易腐*,曾有報導(dǎo)從埋后100 多天的尸體血液中檢出CO。含CO的血樣不密封或露置空氣中,其血中HbCO 易被空氣中氧所置換又轉(zhuǎn)化為HbO2,使分析結(jié)果偏低,
一般采心血量10~20mL即可,裝滿容器密封低溫保存。如需長期保存,為防止HbCO的損失,可于血液表面加0.5~1cm厚的液體石蠟,再密封置低溫冰箱中保存。
二、一氧化碳定性分析
⒈ 化學(xué)檢測法
⑴ 氫氧化鈉法——取含CO的血與空白血各少許均用20倍水稀釋,加入等體積的30%NaOH水溶液混合,對正??瞻籽闯霈F(xiàn)綠褐色絮狀物沉淀,對含CO的血則出現(xiàn)紅色絮狀物浮于液面,紅色絮狀物能逐步氧化為綠褐色絮狀物,變色速度取決于CO在血中的量。
⑵ 鞣酸試驗——取含CO的血與空白血各少許均用4倍水稀釋,加入等體積的3%鞣酸溶液混勻放置,空白血呈灰色,含CO的血則呈桃紅色,顏色保留時間較長,能辨認CO飽和度超過20%的血。
⑶ 快速加熱法——取含CO的血與空白血各1mL,在沸水俗中邊煮邊對比觀察顏色變化,正常血為褐黑色,含CO的血呈桃紅色(飽和度需達30%~40%才有此顏色)
⒉ 鈀鏡反應(yīng)
基于氯化鈀被CO還原為金屬鈀,浮在溶液表面形成金屬光澤的鈀膜稱為鈀鏡。還可根據(jù)還原生成“鈀鏡”的程度來分析血中CO的量。
擴散盒法——在擴散盒內(nèi)圈加0.5%氯化鈀溶液0.5mL,外圈中加2mL檢材血,立即蓋上經(jīng)蒸餾水濕潤過的蓋子,再從蓋子邊上的小口處滴加10滴40%的硫酸,速將蓋子擰緊密封,輕輕轉(zhuǎn)動擴散盒,使硫酸與檢材血充分接觸,如室溫<5℃需水浴上稍加熱,5分鐘后注意觀察擴散盒內(nèi)圈有明顯鈀鏡產(chǎn)生。
PdCl2+CO+H2O → Pd↓+CO2+HCl
為防止硫化氫的干擾,在含CO的血中加稀酸促使碳氧血紅蛋白解離同時,可加入醋酸/醋酸鉛除去干擾。此方法靈敏度高,但屬性差點。